Postup určovania krvných skupín podľa systému ABOTo je identifikovať antigény A a B v erytrocytoch štandardnými za použitia protilátok a aglutiníny v plazme alebo sére analyzované štandardnými krvných erytrocytov. Táto technika bola vyvinutá na začiatku 20. storočia a stále sa aktívne používa v medicíne. Určenie antigénov A a B je spôsobené anti-A a anti-B zeolitom.

Základné pojmy

Darcovia sú vždy určovaní nielen antigénmiv erytrocytoch, ale aj aglutiníny v sére (plazma) pomocou štandardných erytrocytov. Venózna krv sa používa ako biomateriál. Pred testom sa musíte denne pred testom vzdať tukového jedla a fajčiť asi pol hodiny predtým, než urobíte test. Krvné skupiny sa určujú dvakrát: najprv v oddelení liečby, kde sa materiál zozbiera, a potom sa potvrdí štúdiou v laboratóriu.

stanovenie krvných skupín avo v krížovom smere

Definícia krvných skupín podľa systému ABO jehlavný test používaný v transfúziológii. Podobný systém krvných skupín je prítomný aj u niektorých zvierat, napríklad u šimpanzov, goríl a bonobov.

História objavu

Vo vede existuje všeobecne akceptovaný názormetóda určovania krvných skupín podľa systému ABO bola prvýkrát odhalená Karlom Landsteinerom, rakúskym vedcom, v roku 1900. Potom opísal vo svojej práci tri typy antigénov. Za tridsať rokov získal Nobelovu cenu za medicínu a fyziológiu. Vzhľadom na to, že medzi vedcami neboli blízki spoje, a neskôr zistil, že český lekár Jan Jánský sérologie ohľadu na výskumné Karl Landsteiner prvýkrát opísal štyri skupiny z ľudskej krvi, ale jeho štúdie neboli známe širokej verejnosti. V súčasnosti je to klasifikácia vyvinutá J. Janskym, ktorá sa uplatňuje v Rusku av republikách bývalého ZSSR. V USA WL Moss vytvoril svoju podobnú prácu v roku 1910.

metóda krvného zoskupenia

Metóda určovania krvných skupín podľa systému ABO pomocou tsoliklonov

Krvná skupina by sa mala stanoviť vo vnútridobré osvetlenie s teplotným rozsahom 15 až 25 stupňov Celzia, pretože odchýlky od tejto normy môžu ovplyvniť výsledky štúdie. Iniciály a priezvisko pacienta sú uvedené na štítku alebo štítku. Zľava doprava alebo okolo kruhu sa použije štandardná notácia pre skupiny (O (I), A (II), B (III)). Pod nimi sa príslušné séra umiestnia po kvapkách samostatnými pipetami pre každý druh. Potom sa pacientovi pridá krv. Materiál pre výskum sa odoberá z ušného laloku alebo prsta. To si vyžaduje metódu stanovenia krvnej skupiny podľa systému ABO.

Použitie erytrocytov,ktoré sú v trubici po vytvorení zrazeniny. Je potrebné, aby množstvo séra bolo desaťnásobne vyššie ako množstvo pridanej krvi. Potom sa kvapky zmiešajú so sklenenými tyčinkami (samostatne pre každý). Počas piatich minút opatrne posúvajte talíř a pozorujte vzhľad hemaglutinácie. Zistil sa, že malé červené hrudky sa objavujú a zlučujú sa na väčšie. Sérum v tomto čase takmer úplne stráca farbu.

S cieľom odstrániť falošnú hemaglutináciujednoduché lepenie erytrocytov je potrebné po troch minútach pridať jednu kvapku fyziologického roztoku a skontrolovať, či zostáva aglutinácia. Ak áno, potom je to pravda. Všetko je tu definícia krvných skupín podľa systému ABO.

definovanie krvných skupín systémom avo

Interpretácia výsledkov

Výsledkom toho môžu byť štyri reakcie:

  • žiadna aglutinácia nedochádza k žiadnemu zo sér - prvej skupine O (I);
  • reakcia sa prejavila sérom I (ab) a III (a) - druhou skupinou A (II);
  • aglutinácia sa vyskytuje so sérom I (ab) a II (b) - treťou skupinou B (III);
  • ak sa reakcia vyskytne pri troch sérach,Je potrebné vykonať ďalší postup s reagenciami skupiny AB (IV), ktoré sú štandardné; ak v takejto kvapke nedôjde k aglutinácii, môžeme predpokladať, že ide o 4. krvnú skupinu AB (IV).

Expresná metóda pre faktor Rh

Spôsob stanovenia krvných skupín podľa systému ABO predpokladá simultánnu detekciu Rh faktora (Rh).

Povrch dosky je predbežne navlhčený apíšu na ne "kontrolné sérum" a "antiresus sérum". Potom sa pod nápisy umiestnia jedna alebo dve kvapky potrebných činidiel a k nim sa pridá analyzovaný materiál. Pre tento účel možno použiť aj krv z prsta (v rovnakej výške, ako je objem séra) alebo červených krviniek zostávajú na dne skúmavky po objavení zrazeniny (polovica objemu séra). Výber materiálu pre konečný výsledok nie je ovplyvnený. Potom sa krv a sérum zmiešajú so suchou sklenenou tyčinkou, po čom čakajú, kým sa reakcia nevyskytne počas piatich minút. Aby sa eliminovali falošné čítania, po troch až štyroch minútach sa pridá izotonický roztok chloridu sodného (len niekoľko kvapiek). Stanovenie krvnej skupiny podľa systémov ABO a Rh sa veľmi často uskutočňuje.

algoritmus na stanovenie krvnej skupiny systémom avo

Ak aglutinácia erytrocytov v kvapke sdôjde k sére, čo naznačuje pozitívnu Rhesusovú krv. Podľa štatistík sa Rh + vyskytuje u 85% svetovej populácie. Chýbanie nám umožňuje hovoriť o Rh-negatívnej príslušnosti. Ak sa aglutinácia objavila v kontrolnom sére, stala sa nepoužiteľná. Bohužiaľ algoritmus na určenie krvnej skupiny podľa systému ABO nie vždy funguje perfektne.

Aké chyby je možné pri tejto technike urobiť?

Nepresnosti pri určovaní krvi patriacej do určitej skupiny závisia od nasledujúcich dôvodov:

  • Technická.
  • Biologická špecifickosť krvi.
  • Neúplná povaha štandardných sér a erytrocytov.

Technické chyby

Možné chyby pri určovaní krvnej skupiny ABO systému krížom:

  • Nesprávne sérum na tanieri.
  • Nesprávne kvantitatívne pomery materiálu.
  • Použitie nedostatočne čistých dosiek alebodosky, ktoré prichádzajú do kontaktu s krvou (každé sérum sa musí odobrať samostatnou pipetou, ktorá sa má premyť roztokom chloridu sodného (v koncentrácii 0,9%)).
  • Nesprávne nahrávanie analyzovaného materiálu.
  • Nedodržanie času potrebného nazačiatok aglutinácie - nie je potrebné spomínať a reakciu brať do úvahy pred uplynutím piatich minút, pretože krv môže mať slabé aglutinogény. Prekročiť to tiež nie je nutné, pretože kvapky môžu vyschnúť od okrajov a viesť k falošnému záveru. Je dôležité dodržiavať pravidlá na určenie krvnej skupiny podľa systému ABO.
    stanovenie krvných skupín systémom avo použitím štandardných sér
  • Chybné odstreďovanie môže tiež viesť k falošnému výsledku.
  • Teplota vzduchu prekročená prípustná,ovplyvňuje neprítomnosť aglutinácie. Aby ste sa vyhli chybám tohto druhu, musíte použiť špeciálne sérum určené na prácu v horúcich klimatických podmienkach. Určte krvné skupiny na doske alebo doske, ktorej vonkajší povrch spadne do studenej vody.

Chyby biologickej špecifickosti

Chyby spojené s biologickou špecifickosťou analyzovanej krvi sa delia na dva typy.

  • Závisí od charakteristík červených krviniek.
  • Chyby spôsobené biologickými vlastnosťami séra.

Pozrime sa na každý druh podrobnejšie.

Závisí od charakteristík červených krviniek

  • Neskorá aglutinácia spôsobená "slabým"formy erytrocytov a antigénov. Aby sa predišlo chybám, je potrebné určiť krvnú skupinu darcov a príjemcov pomocou štandardných erytrocytov. Identifikujte aglutinogén A2 by sa mali opätovne skúmať s inými typmi reagencií a iných jedál, čím sa zvýši doba záznamu reakcie.
  • "Panaglutinácia" ("autoaglutinácia") - zručnosťkrvi, aby sa ukázala rovnaká reakcia nešpecifickej povahy so všetkými sérami vrátane ich vlastných. Po piatich minútach sa zhoršuje ostrosť takejto aglutinácie, aj keď by sa mala zintenzívniť. Podobné prípady sú pozorované u pacientov s rakovinou, spálené atď. Ako kontrola je potrebné vyhodnotiť prejav aglutinácie analyzovaných erytrocytov v štandardnom sére štvrtej skupiny a fyziologického roztoku. Pri "panaglutinácii" je krvná skupina určená v dôsledku trojitého prania červených krviniek. Ak neprinesie požadovaný výsledok, stojí za opätovné odber vzoriek krvi v predhriatej skúmavke a vzorku umiestnite do termo-kontajnera, aby ste udržali teplotu 37 stupňov Celzia a viac. Potom sa má dodať do laboratória, kde sa udržuje vyššie uvedená teplota, a použije sa vyhrievaný fyziologický soľný roztok, platňa a činidlá.

pravidlá určovania krvnej skupiny systémom avo

  • Niekedy sa analyzujú červené krvinky krvisú usporiadané ako "mince" a môžu sa považovať za aglutináty. Ak pridajte dve kvapky izotonického roztoku a jemne pretrepte doštičku, červené krvinky získajú správnu polohu.
  • Neúplné alebo zmiešané aglutinácia, vyskytujúce sa u pacientov s druhou, tretej a štvrtej skupiny v dôsledku transplantácie kostnej drene, alebo v prvých troch mesiacoch po transfúzii, 0 (I).

Vzhľadom na biologické vlastnosti séra

  • Počas rutinného testovaniapredchádzajúca senzibilizácia odhalila protilátky s inou špecifickosťou. Musíme ju určiť a vyzdvihnúť červené krvinky bez toho, aby obsahoval antigén, na ktorý je detekovaná imunizácia. Príjemca musí nevyhnutne vybrať kompatibilnú darcovskú krv individuálne.
  • Neexistujú žiadne protilátky A a B, ktoré sa pozorujú u novorodencov a pacientov trpiacich potláčaním humorálnej imunity.
  • Pri vytváraní "mincí" anomálnevýsledok musí byť potvrdený prijatím štandardných červených krviniek prvej skupiny. Roztok chloridu sodného a kolísanie dosky pomáha rozlišovať skutočné aglutináty a "mince".
    stanovenie krvných skupín systémom avo pomocou tsolibónov

Chyby súvisiace s používaním nižších štandardných erytrocytov a sér

Slabé séra s trvanlivosťou v minulosti alebo s titrom menším ako 1:32 sú schopné iniciovať slabú a oneskorenú aglutináciu. Použitie takýchto činidiel je neprijateľné.

Použitie nevhodných štandardných červených krviniekalebo srvátky, pripravené za nesterilných podmienok a konzervované v nedostatočnej miere, vedie k vzniku "bakteriálnej" aglutinácie, ktorá je nešpecifickej povahy.

Existuje veľa populárnych predpokladov okrvných skupín systému ABO, ktoré sa objavili hneď po jeho zistení v rôznych svetových kultúrach. Napríklad v 30. rokoch minulého storočia v Japonsku av niektorých ďalších krajinách získala popularita teória, ktorá spájala krvnú skupinu s jedným alebo druhým typom osobnosti. Podobné teórie sú dnes populárne.

K dispozícii je tiež viera, že človek so skupinou A, je predmetom ťažké opice, O je spojené s dobrými zubami a skupiny A2 - s najvyššou úrovňou IQ. Takéto tvrdenia však nie sú vedecky dokázané.

Preskúmali sme definíciu krvných skupín pomocou systému ABO pomocou štandardných sér.

</ p>